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特性 | 优势 | RIPA裂解液是一种传统的组织细胞快速裂解液。本产品主要含有Triton X-100及其他多种裂解缓冲液。能够有效裂解组织细胞中的可溶性蛋白,并将其释放。用于WB实验。 |
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特性 | 优势 | RIPA裂解液是一种传统的组织细胞快速裂解液。本产品主要含有Triton X-100及其他多种裂解缓冲液。能够有效裂解组织细胞中的可溶性蛋白,并将其释放。用于WB实验。 |
产品简介:
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer-Strong)是一种传统的组织细胞快速裂解液。本产品主要含有Triton X-100及其他多种裂解缓冲液。能够有效裂解组织细胞中的可溶性蛋白,并将其释放。用于WB实验。裂解获得的蛋白可用BCA蛋白定量试剂盒进行蛋白浓度测定。
操作步骤:
1.细胞样本裂解:
取适量RIPA裂解液,在使用前加入1%PMSF(PMSF的终浓度为1mM)蛋白酶抑制剂(终浓度为1X)。
贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液清洗1次,按照 6 孔板每孔加入200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后,细胞可被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,VOTEX震荡几秒。按照6孔板每孔细胞加入 200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀.如果细胞量较多,则分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
2.组织样本裂解:
将组织剪成小碎块,取适量RIPA裂解液,在使用前加入1%PMSF(PMSF的终浓度为1mM)或蛋白酶抑制剂(终浓度为1X),按照每20mg组织加入200ul裂解液(若为不易裂解的组织可酌情多添加裂解液)
利用研磨器或者超声波裂解组织细胞充分裂解后,按照10000-14000g离心,取上清,进行后续的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
产品特色:
RIPA裂解液是一种传统的组织细胞快速裂解液。本产品主要含有Triton X-100及其他多种裂解缓冲液。能够有效裂解组织细胞中的可溶性蛋白,并将其释放。用于WB实验。裂解获得的蛋白可用BCA蛋白定量试剂盒进行蛋白浓度测定。
本品不含有酶抑制剂,使用时,需添加1% PMSF或者蛋白酶抑制剂混合液(100X)用于蛋白酶抑制,若检测指标涉及磷酸化蛋白,还需添加磷酸酶抑制剂混合液(100X)用于蛋白样品中磷酸酶抑制。
保存条件:
保存:4℃,运输:4℃或RT,有效期:24个月。
注意事项:
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅供科研,请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
注意事项:
1、本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放普通住宅区。
2、 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
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