组成部分:细胞 T25瓶 细胞数量1-3百万级别+说明书
组织来源:皮肤
形态特征:成纤维样
生长特性:贴壁生长
培养条件:培养基:90% DMEM培养基+10% 特级胎牛血清
气相:空气95%,二氧化碳5%
温度:37℃
TE353.sk细胞,人正常皮肤细胞 操作步骤:
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;
2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,第一次传代比例为1:2。
3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为消化时间,记录消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入培养基重悬细胞,进行传代。
注意事项:
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。
5 因细胞产品的特殊性,如客户对本公司细胞质量存有疑问,请于收到细胞后两个月内与本公司销售联系,超过时间段,本公司则默认细胞质量优良,不承担因细胞产生的任何责任。