特点 | 完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+10000ng/ml L 血清我们推荐用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% |
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特性 | 贴壁生长,上皮细胞 | 优势 | 已通过STR鉴定,正确细胞,放心购买 |
特点 | 完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+10000ng/ml L 血清我们推荐用: GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培养条件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% |
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特性 | 贴壁生长,上皮细胞 | 优势 | 已通过STR鉴定,正确细胞,放心购买 |
收到细胞后,在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的第一次传代一般是一传二。
注:1、观察细胞最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。
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