无血清细胞冻存液(冻存步骤)
1、常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2、根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3、将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5 分钟离心收集培养细胞沉淀,彻底弃去离心管中的上清液。
4、加入适量的HATAKA无血清细胞冻存液细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为 5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5、将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管 1ml 或 1.5ml。
6、直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7、如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少一天时间,方可移至液氮罐中保存。
无血清细胞冻存液(复苏步骤)
1、从冰箱中取出冻存的细胞,立即放入 37℃水浴槽中快速解冻。
2、待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合,加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混合液移至事先准备好的培养容器中。
3、镜检细胞后,可根据各自研究的需要和方法经行细胞常规培养。
无血清细胞冻存液 质量保障 HAKATA无血清细胞冻存液细胞冻存液经过严格的内毒素、渗透压、病原体和 pH 检验,确保产品不含病菌、病毒以及支原体等。用于常规的细胞冻存,-80℃可长期保存(>5 年),细胞存活率在90-98%。
注意事项 HAKATA无血清细胞冻存液在冻存细胞分装后,应减少在外存放时间,尽快移入到-80 ℃超低温冰箱。 对于干细胞(ES 细胞)等冻存时,我们建议用户在使用前,事先对所冻存的胞进行至少为期1周的该产品试验性细胞冷冻保存培养,确认性能后再进行正式冻存。 本品含有 10%DMSO,部分对 DMSO 敏感的细胞,建议对其进行至少1周的本产品试验性的细胞冻存培养,确认性能后再正式冻存。 |