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C1498细胞,小鼠急性骨髓性白血病

产品货号ALWS-432
产品规格T25
目录价格 1200.00
产品信息
特点 DMEM培养基; 10%胎牛血清;1%双抗;复苏5-7天,冻存次日发货
特性 悬浮生长,淋巴母细胞样;C1498 are lymphoblasts that were isolated from a female mouse with acute myeloid leukemia. It has applications in immune system disorder research. Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox). They are resistant to 0.1 mM cortisol
优势 STR原始数据图谱,支原体、真菌、细菌检测报告 T25瓶80%密度提供发货照片;≥1*106冻存管2支;二选一 1、提供代数靠前细胞 2、公司常年有不同买馈赠、促销等活动形式 3、价格优势 4、售后服务到位,专业技术一对一操作指导
产品详情

细胞接收处理过程:

1、请显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时 细胞状态的依据。

2、收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,不开瓶盖放培养 箱静置2-3小时稳定细胞状态。

3、镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,重新加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2培养 箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存。

4、悬浮细胞需离心收集处理。抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心3-5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照 说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。

(注意:若发货的是密封培养瓶,处理完后放入培养箱培养,记得培养瓶盖子拧松,初次传代最好使用T25培养瓶或6cm小皿1传2)

贴壁细胞漂浮的处理方法:

注意:部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免 因素,正确处理后均可以正常生长。

STEP1将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力,离心3-5min)去除旧培养基;

STEP2:PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm约250g-300g离心力,离心3-5min)去除PBS;

STEP3:加入1ml左右胰酶EDTA溶液,0.25%重悬细胞,混匀即可,建议震动离心管混匀,避免吹打细 胞,放入培养箱消化细胞,根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟);

注意:部分细胞不能使用胰酶消化,请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。

STEP 4消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3-5ml含10%以上血清的培养基混匀终止消化,离心(1200rpm 3min)去除胰酶;

STEP5:加入5ml左右的细胞完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶中;

STEP6:显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化,使之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。

悬浮细胞收集的处理方法:

注意:瓶中运输培养基不能继续使用,请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养 悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。

STEP1:静置4h后,请将瓶内所有细胞收集至6个15ml 的离心管110g(1000rpm)  离心3min, 将所有离心 后的细胞沉淀收集到一个T25 培养瓶内,平放10分钟,镜下观察细胞密度,拍照记录后放入培养箱中继 续培养,第二天密度达到80%即可传代;

STEP2:悬浮细胞半换液处理:将培养瓶竖立在培养箱中静置1小时左右,轻轻吸掉瓶内3ml 培养 基,然后补给3ml 的细胞完全培养基,传代的时候可以直接补给5ml 细胞完全培养基,分两个培养瓶 培养,一般这样传代3次左右可以离心传代一次,去掉死细胞;

STEP3:悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下,建议直接加入新鲜的细胞完全培养基直 接分瓶即可。

售后服务:

1.常温细胞为 T25 培养瓶发货,若收到细胞后状态差,活率低,请当天拍照记录,发给技术支持或 者销售人员;根据情况,不能调整或者调整培养一周后,状态没好转的,可给予重发细胞。

2. 收到细胞24小时内出现细菌、真菌、霉菌污染给于免费重发。4 8 小 时检测支原体阳性无条件重发 。(吸取上清至冰箱保存48小时之后检测的不算准确结果)收到细胞有污染现象,请于收货当天 及时拍照记录,提供清晰的照片(照片为原培养瓶未拆封外观照和显微镜下细胞状态的照片);在培养 瓶未开封的情况下,可给予重发细胞。

3.若收到细胞有漏液现象,请于收货当天及时拍照记录(照片为原培养瓶未拆封外观照和显微镜下细 胞状态的照片);请保留原瓶培养基,并将原瓶培养基转移到一个无菌的容器内培养,培养3天内出现 细胞污染现象,可给予重发细胞。

4. 收到常温细胞时状态无异常,用户自身操作导致细胞污染、细胞状态不佳、细胞冻存后复苏不活 的,不予免费重发。

5. 细胞培养时,使用其他非细胞培养体系外源试剂处理导致细胞出现问题,不予免费重发。

6.非细胞出厂质量问题,客户自身操作导致的细胞死亡,自收货日起一个月内可以申请低价二次购 买折扣(原代细胞除外)。

7.细胞相关实验受多种因素影响,非细胞鉴定问题,实验数据不理想的,不予退/换细胞。

常温细胞收货注意事项:

观察是否有异常现象

收到货后如发现有任何异常现象,如污染,漏液,细胞漂浮等,请拍照记录,并及时联系我们销售 人员或者技术支持。

将培养瓶放置培养箱中静止

75%酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,将 T25 瓶置于培养 箱中静置2~4h 后进行操作,(注意:悬浮细胞请将培养瓶竖立在 培养箱中静置),在此期间,请查看说明书以确定细胞属性。

观察细胞密度是否超过80%

观察细胞密度,若超过80%则可正常传代处理(有些原代细胞不 可传代,请仔细查阅细胞说明书并根据实际情况决定),首次传代推 荐比例1:2。

注意:传代比例指的是同等大小容器的前提下,如需更换培养容器,则需换算培 养容器贴壁面积,例如:一个T25 瓶的贴壁面积相当于1个6cm 的皿,1个10cm  的皿的贴壁面积相当于3个T25瓶,1个T75瓶的贴壁面积相当于3个T25 瓶。

观察细胞密度,若细胞密度不到80%,建议吸出运输培养基,加入5ml 细胞完全培养基,培养到可传代密度。

 

特殊细胞收到注意事项

部分细胞由于贴壁不牢在运输过程中发生细胞脱落,这是正常现象,正确处理后都可以正常生长。

1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm3-5min)去除旧培养基;

2、用PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm3-5min)去除PBS;

3、加入1ml左右0.25%胰酶重悬细胞,混匀即可,不能吹打太多次,放入培养箱消化,根据细胞特性决定消化时间(约1~2分钟);

4、消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3-5ml完全培养基混匀以终止消化,离心(1200rpm3-5min) 去除胰酶;

5、加入5ml左右细胞相应的完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶/皿中;

6、显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化,使之贴壁,待细胞生长稳定后再 消散细胞。

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