0.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液说明书
产品名称：0.25%胰酶溶液
货号：H0518
规格：100ML
一、产品组成与性质
主要成分：胰蛋白酶（2.5 g/L）、EDTA-2Na（0.2 g/L）、酚红指示剂，溶剂为 PBS 缓冲液。
理化性质：红色澄清液体，pH 7.2-8.0，无菌处理，含低温保存环境下 12 个月有效期。
二、操作步骤（以贴壁细胞为例）
预处理
弃去原培养基，用预温的 DPBS 或无血清培养液洗涤细胞 1 次，去除残留血清。
消化
加入适量胰酶溶液（如 75 cm²培养瓶加 5 ml），确保覆盖细胞层，37℃孵育 1-3 分钟。
显微镜观察细胞收缩或边缘卷起时终止消化（轻拍容器辅助脱落）。
中和与收集
加入含血清的完全培养基（体积≥胰酶量 2 倍）终止反应，吹打混匀后转移至离心管。
1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清后重悬细胞并计数。
三、注意事项
消化控制
消化时间因细胞类型而异，敏感细胞（如原代细胞）需缩短时间或降低浓度至 0.05%。
无菌操作
避免反复冻融，分装后-20℃保存；开封后建议 4℃短期存放并尽快使用。
溶液状态
酚红变色（如偏紫色）提示 pH 异常，需更换新鲜消化液。
特殊应用
含 EDTA 的溶液可能影响后续实验（如流式检测），可换用不含 EDTA 的胰酶。
四、储存条件
未开封：-20℃避光保存，有效期 12 个月。
开封后：4℃保存不超过 1 个月，避免污染。
五、适用场景（注意事项：仅限科研用途，不可用于临床）
贴壁细胞传代（如肿瘤细胞、干细胞）。
单细胞悬液制备（用于流式细胞术、细胞分选）。
初生组织块解离。
特别说明：
本产品含磷酸盐体系，在低温冷冻保存后溶液呈黄色。这是由于温度导致溶液pH值发生变化，在正常解冻复温后即恢复为红色，不影响产品使用性能。可能会因某些原因（例如采用干冰运输）导致溶液pH略微下降，从而使溶液颜色由红色变成浅黄色。该种浅黄色的溶液依然可以使用，或者也可采用无菌的2M NaOH溶液对pH进行微调后使用。
