悬浮细胞复苏、传代、冻存及注意事项
一、接收注意事项：
1.悬浮细胞经过快递运输，会出现细胞皱缩和死细胞碎片等情况，收到时先放培养箱竖着静置4小时以上，细胞全部沉淀在底部后轻轻转移至超净工作台吸出瓶内上半部分培养基进行离心收集（避免丢失细胞）收集后如有细胞沉淀可以用新培养瓶和培养基继续培养，如离心管底没有沉淀可直接丢弃。
下半部分细胞悬液平放显微镜下静置后观察密度和状态，拍照反馈到群里，根据图片可以给出接下来的处理建议（传代或者换液）
二、悬浮细胞传代： 如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
方法一：将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加新鲜培养液后重悬混匀按1：2的比例分到 新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力。
方法二：1) 半换液处理，竖着培养瓶静置 10-20min 左右，肉眼可见大部分细胞沉在底部；
2) 轻轻吸掉 3ml 左右培养基，将剩余细胞悬起混匀；
3) 将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中，一般这样传代 3 次左右可以离心传代一次
注意：使用试剂需要提前37度复温，避免细胞遇冷受刺激皱缩。
三、后续处理建议：
悬浮细胞状态在无碎片无黑点的情况下无需换液，观察培养基偏黄及时进行补液2ml左右，当细胞出现分泌物可以使用半换液法处理，参考如下图片：
