组织来源：法氏囊

　　疾病：淋巴瘤

　　传代比列/细胞消化：1:2传代

　　培养条件：DMEM养基;10%胎牛血清;5%鸡血清; 0.05mMβ-巯基乙醇; 1%双抗

　　介绍：DT40是来自Hyline SC鸡法氏囊淋巴细胞株经鸟类白血病病毒诱导建株的。原始淋巴瘤用罗氏相关病毒1(RAV-1)感染出生1天的小鸡得到。法氏囊中生成的肿瘤制成细胞悬液后通过静脉注射输入同基因型的受体小鸡。经过一次体内移植后，建立了DT40细胞株。 这株细胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表达的c-myc RNA水平较高。它缺少一个正常c-myc基因，但含有两个拷贝ALV去调控的myc基因。这株细胞保留了重排免疫球蛋白轻链基因(IgL)的能力。 在IgL位点，DT40包含一个重排和一个胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在DT40细株中都能诱导组织相容性(MHC)II类抗原表达。v-rel 诱导的MHCII表达比c-rel诱导快，且其有效性在数周后达到c-rel的50倍。这株细胞呈淋巴母细胞表型。传染性检测表明DT40释放低水平的传染性RAV-1。这株细胞可以用于稳转研究。

　　形态：淋巴母细胞样

　　倍增时间

　　培养条件

　　冻存条件

　　悬浮生长

　　~48h

　　气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

　　冻存液：90%FBS，DMSO 10%,

　　或使用非程序冻存液

　　保藏机构

　　备注ATCC; CRL-2111

　　该细胞为悬浮细胞，请注意离心收集细胞悬液，请勿直接倒掉细胞培养液。

　　仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

　　产品使用

　　细胞接收处理流程：

　　1：观察有无破损漏液情况，如有请拍照及时联系客服。

　　2：酒精消毒培养瓶表面后显微镜下观察细胞状态，观察拍照后不用打开培养瓶盖 放入培养箱静

　　止2-3小时稳定 细胞状态。

　　3：请按照细胞操作指南进行第一次传代冻存处理。

　　4：产品随货会附带细胞说明书、细胞培养操作指南、细胞鉴定、支原体检测报告。

　　5：若产品有异常或其他疑问，可随时联系客服;转至技术支持。

　　DT40细胞，鸡淋巴瘤细胞培养方法

　　常温细胞收货当天处理方式

　　1.收到常温细胞后，及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。

　　2. 镜下观察有无微生物污染现象，拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象， 方便后续售后处理。

　　3. 消毒后，更换赠送的培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集重新接种止培养瓶。

　　4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代，请根据实际情况决定)，传代推荐比例 1：2 到 1：3(按实际收货细胞密度决定，若不确定 可联系技术支持);若细胞密度不到 80%则可继续培养，注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收集细胞。

　　5. 由于气温，运输等影响造成贴壁细胞漂浮的，请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代(参考附件)，或及时联系技术支持进行指导传代。贴壁细胞传代：1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃;

　　2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层，前后摇晃容器数次

　　3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃，向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层(T25为1ml);

　　4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异);

　　5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%，可将孵育时间延长几分钟，每 30 秒钟检查一次解离情况;

　　6.细胞解离程度大于等于 90%时，倾斜培养容器，使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍体积的预热生长培养基;吹打细胞层表面数次，使培养基分散;

　　7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中，以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟(请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异);

　　8.用最少体积的预热生长培养基重新悬浮细胞沉淀，将细胞悬液按照推荐比例稀释，并将适量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中，把细胞放回培养箱(注：如果使用培养瓶，将其放入培养箱前应将瓶盖旋松，以便进行充分的气体交换，除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶盖)。

　　悬浮细胞传代：将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min，收集上清，加 1-2ml 培养基重悬，按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中，补充5-8ml/瓶新的培养基 ，最后放入细胞培养箱中培养。